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饲料中三聚氰胺的测定SOP
1.目的
该SOP用于饲料中三聚氰胺的含量的高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱质谱联用法(GC
-MS)，其中气质法为确证法。
2.适用范围
该SOP适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料、植物性蛋白饲料、宠物饲料（
干粮、罐头）中三聚氰胺的测定。
3.HPLC法
3.1原理
试样中的三聚氰胺用三氯乙酸溶液提取，提取液离心后经混合型阳离子交换固相萃取柱
净化，洗脱物吹干后用甲醇溶液溶解，用高效液相色谱仪进行测定。
3.2试剂与材料
除另有规定外，仅使用分析纯试剂和符合GB/T 6682的三级水，色谱用水符合GB/T 6682
一级水的规定。
3.2.1 甲醇：色谱纯。
3.2.2 乙腈：色谱纯。
3.2.3 氨水：浓度25%-28% 。
3.2.4 混合型阳离子交换固相萃取柱：60mg,3mL。
3.2.5 10g/L三氯乙酸溶液:称取10g三氯乙酸加水至1000mL。
3.2.6 22g/L乙酸铅溶液：取22g乙酸铅用约300mL水溶解后定容至1L。
3.2.7 提取液：取480mL10g/L三氯乙酸溶液，加入20mL22g/L乙酸铅溶液，混匀。
3.2.8 5%氨化甲醇溶液：量取5mL氨水，溶解于100mL甲醇中。
3.2.9 20%甲醇溶液：200mL甲醇加入800mL一级水，混匀。
3.2.10 流动相：称取2.02g庚烷磺酸钠和2.10g柠檬酸于1L容量瓶中，用水溶解并稀释
至刻度。取该溶液900mL加入100mL乙腈。
3.2.11 三聚氰胺标准品（纯度＞99%）。
3.2.12 三聚氰胺标准溶液
3.2.12.1 标准贮备液：称取100mg（精确到0.01mg）的三聚氰胺标准品，用20%甲醇溶
液溶解并定容至100mL容量瓶中，该溶液浓度为1mg/mL，于4℃冰箱内保存，有效期3个
月。
3.2.12.2 标准工作液：取三聚氰胺标准贮备液，用20%甲醇溶液分别稀释成1.0、5.0
、10、25和50𝝁g/mL，于4℃冰箱内保存，有效期1周。
3.3 仪器与设备
3.3.1 高效液相色谱仪，配有二极管阵列检测器或紫外检测器。
3.3.2 离心机：10000r/min。
3.3.3 涡旋混合器。
3.3.4 超声波清洗器。
3.3.5 氮吹仪，可控温至60℃。
3.3.6 固相萃取装置。
3.3.7 振荡摇床。
3.4 检验步骤
3.4.1 试样的制备
3.4.1.1 取粉碎后的供试样品，作为供试试样。
3.4.1.2 取粉碎后的空白样品，作为空白试样。
3.4.1.3 取粉碎后的空白样品，添加适宜浓度的工作液（500𝝁g/mL×0.1mL）
，作为空白添加试样。
3.4.2 提取
3.4.2.1 配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料和宠物饲料（干粮）中三聚氰胺的
提取
称取2.5g试样（精确至0.01g），准确加入25 mL提取液，超声20min，静置2min，取上
层提取液约20mL转入离心管中，10000r/min离心5min。
3.4.2.2 宠物饲料（罐头）中三聚氰胺的提取
称取2.5g试样（精确至0.01g），加入25 mL乙醚，摇床上120r/min振荡1h，弃去乙醚，
再加入25 mL，重复一次，弃去乙醚，其余步骤同3.4.2.1。
3.4.3 净化
分别用3mL甲醇，3mL水活化混合型阳离子交换固相萃取柱，准确移取10mL离心液分次上
柱，控制过柱速度在1mL/min以内。再用3mL水和3mL甲醇洗涤混合型阳离子交换固相萃
取柱，抽近干后用5%氨化甲醇溶液3mL洗脱。洗脱液用氮气吹干，水浴温度设为50℃。
精确量取20%甲醇溶液2 mL溶解残留物，涡旋1min，过0.45 𝝁m滤膜，上机测定。
3.4.4 液相色谱条件
色谱柱：C8柱，150×4.6mm，5𝝁m；或性能相当的色谱柱
柱温：30℃
流动相流速：1.0mL/min
检测波长：240nm
3.4.5 测定
按照保留时间进行定性，试样与标准品保留时间的相对偏差不大于2%，单点或多点校正
外标法定量。待测样溶液中三聚氰胺的响应值应在工作曲线范围内。
3.5 结果计算和表述
3.5.1 试样中三聚氰胺的含量X，以质量分数毫克每千克(mg/kg)表示，单点校正按照
公式(1)计算
………………………………………………………………（1）
式中：
A ——试样溶液对应的色谱峰面积
Cs——三聚氰胺标准溶液浓度，单位𝝁g/mL
V1 ——提取液体积，单位mL
V3 ——净化后加入的甲醇溶液体积，单位mL
V2 ——过柱提取液体积，单位mL
As——三聚氰胺标准溶液对应的色谱峰面积
m——试样质量，单位g
多点校正按照公式(2)计算
………………………………………………………………（2）
式中：
Cx——标准曲线上查得的试样中三聚氰胺的浓度，单位𝝁g/mL
V1 ——提取液体积，单位mL
V3 ——净化后加入的甲醇溶液体积，单位mL
V2 ——过柱提取液体积，单位mL
m——试样质量，单位g
3.5.2 结果表示
平行测定结果用算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
3.6 重复性
在同一实验室由同一操作人员使用同一仪器完成的两个平行测定的相对偏差不大于10%。
4 GC-MS法
4.1 方法原理：
试样中的三聚氰胺用三氯乙酸溶液提取，经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，用N，O
-双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）衍生化，以气相色谱质谱联用仪进行定性和定量。
4.2 试剂和材料
4.2.1 衍生化试剂：BSTFA。
4.2.2 吡啶：优级纯。
4.2.3 其他试剂和材料同3.2.1-3.2.8、3.2.11、3.2.12。
4.2.4 标准工作液：取3.2.12.2标准工作液，用甲醇分别稀释成浓度为0.05、0.1、0.
2、0.5和1.0𝝁g/mL的标准工作液。
4.3 仪器和设备
4.3.1 气相色谱质谱联用仪。
4.3.2 其他同3.3.2-3.3.7。
4.4 分析步骤
4.4.1 前处理同3.4.2-3.4.3，但需根据洗脱液中三聚氰胺的浓度用甲醇进行适当稀释。
4.4.2 衍生化
取4.4.1的稀释液400𝝁L，用氮气吹干，加入200𝝁L的吡啶和200&#
120641;L的衍生试剂，混匀，70℃反应30min。同时用三聚氰胺标准系列或响应浓度单
点标准做同步衍生。
4.4.3 测定
4.4.3.1 GC-MS条件
色谱柱：柱长30m，内径0.25mm，甲基苯基聚硅氧烷涂层，膜厚0.25 𝝁m
载气：氦气，流速为1.3mL/min
进样量：1 𝝁L
进样口温度：250 ℃
升温程序：起始温度75 ℃，持续1.0min，以30 ℃/min升至300 ℃，保持2.0min
传输线温度：280 ℃
扫描模式：选择离子扫描。监测离子99、171、327、342
离子源温度：230 ℃
EI源轰击能：70eV
4.4.3.2 测定
定性方法：试样与标准品保留时间的相对偏差不大于0.5%，特征离子丰度与标准品
相差不大于20%
定量方法：以342，327，171和99峰面积之和或单个离子进行单点或多点校正定量
。
计算公式同液相色谱法
4.5 结果计算和表述
4.5.1 试样中三聚氰胺的含量X，以质量分数毫克每千克(mg/kg)表示，单点校正按照
公式(1)计算
多点校正按照公式(2)计算
4.5.2 平行测定结果用算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
4.6 重复性
在同一实验室由同一操作人员使用同一仪器完成的两个平行测定的相对偏差不大于
20%

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标  题: 论坛笑话
发信站: BBS 荷塘月色站 (Thu Sep 11 17:48:08 2008), 站内

论坛上很黄很暴力的回复
 
1.论坛楼主：我和女朋友的照片，天涯朋友轻砸～ 
　　　　　　论坛回复：植物的性器官插在长角偶蹄类动物的排泄物上…… 
　　 　 
　　2.论坛楼主：我新买了一处庄园，有多大说出来吓死你——我开车绕一圈足足用了两个半小时！！！ 
　　　　　　论坛沙发：嗯，以前我也有这么一辆破车～　 　 
　　 
　　3.论坛楼主：你们女人大夏天的戴胸罩不热吗？ 
　　　　　　论坛回复：我们不带你们会热…… 
　　
　　4.论坛楼主：和女友ML时，女友好像喊了另一个男人的名字…… 
　　　　　　论坛沙发：你日了别人的女人你还有什么不满意的！！！ 
　　 
 
　　5.论坛楼主：为什么胡主席访问日本，日本方面比较冷淡，甚至机场连欢迎标语都没挂？ 
　　　　　　论坛沙发：怎么挂？热烈欢迎中国老朋友来日？　　 
　　 
　　6.论坛楼主：征集骂人最狠且不露脏字的一句话。 
　　　　　　论坛回复31：你妈生你的时候是不是把人扔了，把胎盘养大了？ 

　　7.论坛楼主：老爸送我老公一根鹿鞭，大家说这是啥意思？还有照片的说～ 
　　　　　　论坛沙发：这是老一辈对青年一代的鞭策啊~~~ 
　　 
　　 
　　 
　　8.论坛楼主：《神雕侠侣》里小龙女胳膊上的守宫砂是什么东西，干什么用的？ 
　　　　　　论坛回复：守宫砂是处女的桌面快捷方式。 
　　 
　　 　 
　　9.论坛楼主：新闻说某人被蟒蛇吞了，请问在野外真的遇到蟒蛇怎么办？ 
　　　　　　论坛回复11：掐七寸，捅肛门，两个很有效的方法，希望大家广为传播。 
　　

论坛回复12：捅蛇的肛门还是自己的肛门？ 
　　　　　　…… 
　　　　　　论坛回复47：屁话，荒郊野外的拿什么捅！ 
　　　　　　论坛回复48：许仙知道拿什么捅！ 

10.论坛楼主：夏天得刮腋毛，否则穿短袖会影响我淑女形象的。那再弱弱问一句，阴毛用刮吗？ 
　　　　　　论坛沙发：不刮扎嘴！ 
　　 
　　 　　 
　　11.论坛楼主：帅有个屁用——到头来还不是被卒吃掉！ 
　　　　　　论坛回复：帅有士陪，有炮打，有马骑，有车坐，有相暗恋……帅怎么不好？！！ 
　　

12.论坛楼主：为什么生下的孩子要跟父亲一个姓？ 
　　　　　　论坛沙发：因为取款机里吐出的钱归插卡人所有。 
　 
　　13.论坛楼主：美国一位名叫乔治&赫伯特的推销员成功地把一把斧头推销给小布什总统，因此他获得2005年布鲁金斯学会（世界上最权威、最有影响力的推销员组织）的“金靴”奖。假如给你一次机会向胡主席推销东西，你会选择什么？ 
　　　　　　论坛沙发：我要把俺娘推荐给他！！！ 
 
14.论坛楼主：大家知道，从六教东侧往北的路是个下坡，刚才我来六教时突然看见一可爱MM骑车直冲而下，并高呼“太爽了！”引来不少行人侧目。现在回想起来，MM甜美的声音真是让人回味无穷啊～ 
　　　　　　她喊爽的原因似乎有以下理由： 
　　　　　　1.刚考完试，心情不错； 
　　　　　　2.做完一天功课，我们尽情来欢乐！ 
　　　　　　3.由于是下坡，所以冲下去时清风迎面扑来，所以感觉很爽； 
　　　　　　4.MM刚好看见我这个帅哥，一时激动得无法表白，只好大呼其爽； 
　　　　　　5.大家补充……  
　　　　　　论坛沙发：明天我就把这丫头的车座再装回去！ 
　　　　 
　　
　　15.论坛楼主：反腐真的就这么难吗？ 
　　　　　　论坛沙发：你割割自己的JJ看难不难！！ 
 
16.论坛楼主：美军在伊拉克不能抽身说明美国是个负责任的国家！！！ 
　　　　　　论坛沙发：那我股票被套牢说明我是个负责任的中国股民？？？ 
　　 
　　17.论坛楼主：为什么pol.ice抓坏人时都要鸣警笛？难道不怕坏人老大远就听到跑了？ 
　　　　　　论坛沙发：上级单位来检查之前一般都会事先通知下级单位的～ 
　　 　 
　　18.论坛楼主：据香港翡翠台报道，今晨阿娇在其母亲陪同下到圣约翰女子医院做过检查，医院诊断报告证明其处女膜未见器质性损伤，不信大家可以浏览翡翠台网站（PS裸照的人可耻！）——我永远的阿娇。 
　　　　　　论坛沙发：妈的，你是在嘲笑陈冠希的JJ小吗？！！ 

19.论坛楼主：你小时候曾幻想长大以后什么样的场景会让你在众人面前出尽了风头？ 
　　　　　　论坛板凳：挑一担粪上街，看谁不顺眼就迎面给他泼一瓢！ 
　　 
　　20.论坛楼主：我得了健忘症怎么办？ 
　　　　　　论坛回复：那岂不是很爽？每天早晨醒来发现睡在自己身旁的都是不同的女人~（作者：悲惨的狐狸） 
　　 
　　21.论坛楼主：刚才不小心摔了一跤，结果JJ插进水泥地里拔不出来了，大家说我该怎么办啊？ 
　　　　　　论坛回复：老婆，快来看那，野生的JJ还能长出个人儿来！~（作者：gjqqkk） 

22.论坛楼主：该死的理发店把我头剪坏了！大家出点损招，要求破坏性越大越好，动静越小越好，因为是我一个人去。 
　　　　　　论坛地下室：半夜三更，月黑风高，静静地、轻轻地，一个人吊死在理发店门口…… 
　　 
　　 
　　23.论坛楼主：天涯装B的实在是太多了，讨厌死了！ 
　　　　　　论坛沙发：LZ,Don’t zhuangbility,zhuangbility leads to leipility!（注释：莫装B，装B被雷劈！） 
　　 
　　24.论坛楼主：老娘我简直太有钱了，我该给保姆买辆什么车呢？ 
　　　　　论坛回复：那就要看她跟你老公发展到什么关系了～（作者：elecon） 

25.论坛楼主：他今天山盟海誓说我是他生命中的一部分，我是他身体中的一部分，如果没了我，他就活不下去啦~ 
　　　　　　论坛沙发：我的前男友也是这么说的，后来我才知道，我是他盲肠、阑尾、仔耳、六指这类可有可无的玩意儿！ 
　　 

　　26.论坛楼主（日本人）：金庸阁下武侠小说里的点穴是否构想于我国的推拿按摩？ 
　　　　　　论坛沙发：非也，鄙国的穴是用来点的，贵国的穴是用来日的。 
　　 
　　27.论坛楼主：假如我有一亿人民币，我就可以贷款在汤臣一品买房子了！ 
　　　　　　论坛回复：嗯，不过你还要先借钱交物业费～ 

28.论坛楼主：天涯股市的达人们啊，请告诉我北京奥运会开幕前一天满仓能否把钱赚暴了？ 
　　　　　　论坛沙发：不能，因为8月是以往中国股市最最危险的月份之一，其他最最危险的月份分别是3月、7月、1月、9月、10月、11月、5月、6月、12月、4月和2月。 
　　 
　　29.论坛楼主：我月薪六位数，每月开销也在五位数以上，霍霍，爷我算不算有钱人？ 
　　　　　　论坛沙发：真正有钱人怎么花钱都在自己手上。比如李嘉诚，在香港任何一个地方买东西，最后钱还是回到自己手里~ 　 　 
　　30.论坛楼主：韩国怎么了？谁再拿说韩国说事小心我们跨过“三八线”与你们一战到底！ 
　　　　　论坛回复：CCTV天气预报至少要报三分钟，而贵国只有一句——全国阴天或全国有雨，这样的一个民族也敢与中国一战？ 

31.论坛楼主：你最讨厌最鄙视的国家是哪个？ 
　　　　　　论坛沙发：日本，妈的！ 
　　　　　　论坛楼主：你说话就不能不带脏字吗？ 
　　　　　　论坛沙发：好。 
　　　　　　论坛楼主：请重新回答，你最讨厌最鄙视的国家是哪个？ 
　　　　　　论坛沙发：妈的！ 
　　 
32.论坛楼主：大家聊聊双胞胎的事吧，随便什么都行。我爸就是双胞胎，但一个生下来就死了，一个不到四十也去世了。 
　　　　　　论坛沙发：你爸是哪个？ 　　 
　　 
33.论坛楼主：女友总说自己胸小，我觉得还可以啊，请论坛GG们帮忙鉴定一下～ 
　　　　　　论坛沙发：后背上长俩青春痘！

34.论坛楼主：小时候妈妈告诉我一个道理：如果你和某个人吵架，不一定是你的错；但如果你跟很多人吵架，那一定是你的原因！ 
　　　　　　论坛回复：强盗逻辑！那你妈被很多人L J一定是你妈很Y D的缘故？？？ 
　　 　 　　 
35.论坛楼主：大家猜猜我是哪个国家的混血儿^_^ 
　　　　　　论坛回复：中国人＋变形金钢！ 
　　 
　　36.论坛楼主：求解梦：昨晚我梦见章子怡了，章子怡说她狠喜欢我，可我说我有女朋友了，然后章子怡就哭了。 
　　　　 论坛回复：恭喜楼主变大人了，因为第二天你写的日记叫——《梦怡》！（作者：鼻子抽筋，zZErx） 
　　 
37.论坛楼主：哈哈，成功抢注“功夫熊猫”这个ID，大家说以后我在天涯用这个名字是不是很拉风啊？ 
　　　　　　论坛沙发：你爸是鸭子！

38.论坛楼主：昨晚遛狗时俺们家大藏獒和小树林边一秃毛野狗咬起来。干！没想到藏獒竟然大败给一条草狗！！！ 
　　　　　　论坛沙发：妈的，爷秃之前，他们都叫我狮子！ 
　　 　 
39.论坛楼主：大家说我长得像不像伍佰？ 
　　　　　　论坛回复：只有一半像！ 

40.论坛楼主：王小丫跟陈章良结婚，请用四个字评论。 
　　　　　　论坛回复：丫从良了！ 
　　 
41.论坛楼主：写下你最深爱的一个人伤你最深的话……（作者：jademansion）　 
论坛回复：你进去啦？（作者：roby14